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高效液相色譜儀操作過程及注意事項

2014-12-20 [3309]

高效液相色譜儀操作是應注意什么: 
1、液相色譜儀的流動相應采用色譜純溶劑,以滿足要求、避免損壞色譜柱

2、待分析的樣品必須徹底溶解澄清、過濾,以避免堵塞、損壞色譜柱; 

3、液相色譜儀流動相需經過濾、除氣后方可使用; 

4、嚴禁使用有污染的水等沖洗色譜柱,避免將互不相溶的溶劑一同進入泵內; 

5、液相色譜儀分析完成后,須注意及時清洗色譜柱和檢測器的比色池。 

高效液相色譜儀的操作過程如下: 

1.翻開HPLC工作站(包含計算機軟件和色譜儀),銜接好活動相管道,銜接檢測體系。 

2.對抽濾后的活動相進行超聲脫氣10-20分鐘。 

3.過濾活動相,根據需求挑選不一樣的濾膜。 

4進入HPLC操控界面主菜單,點擊manual,進入手動菜單。 

5.有一段時刻沒用,或許換了新的活動相,需求先沖刷泵和進樣閥。沖刷泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖刷進樣閥,需求在manual菜單下,先點擊purge,再點擊start,沖刷時速度不要超越10ml/min。 

6.調理流量,初度運用新的活動相,能夠先試一下壓力,流速越大,壓力越大,通常不要超越2000。點擊injure,選用適宜的流速,點擊on,走基線,調查基線的狀況。 

7.規劃走樣辦法。點擊file,選擇select?users?and?methods,能夠選擇現有的各種走樣辦法。若需樹立一個新的辦法,點擊new?method。選擇需求的配件,包含進樣閥,泵,檢測器等,根據需求而不一樣。選完后,點擊protocol。一個完整的走樣辦法需求包含:a.進樣前的穩流,通常2-5分鐘;b.基線歸零;c.進樣閥的loading-inject變換;d.走樣時刻,隨不一樣的樣品而不一樣。 

8.進樣和進樣后操作。選定走樣辦法,點擊start。進樣,一切的樣品均需過濾。辦法走完后,點擊postrun,可記載數據和做符號等。悉數樣品走完后,再用上面的辦法走一段基線,洗掉剩余物。 

9關機時,先關計算機,再關液相色譜儀。